DES IMMUNODOTS POUR LA RECHERCHE DES ASCA
Les ASCA sont des anticorps dirigés contre la levure « Saccharomyces cerevisiae ». Le constituant antigénique reconnu par les anticorps se trouve dans l'extrait soluble de la paroi de la levure. Il s'agit d'un composant macromoléculaire, le phosphopeptidomannane, appelé couramment « Mannane ». Les déterminants antigéniques sont représentés par les résidus de Mannose reliées par des liaisons a (1.2) et a (1.3), spécifiques pour Saccharomyces cerevisiae.
Les ASCA ont été retrouvés fortement associés à la maladie de Crohn. Ils peuvent être de classe IgA et IgG. Leur présence permet de différencier cette maladie de la rectocolite hémorragique et des autres colites inflammatoires. La fréquence des ASCA dans la maladie de Crohn varie, selon les publications, de 40 à 70%. Elle est fonction de l'état clinique des malades et de la méthode employée pour la recherche des anticorps. Il apparaît clairement que les ASCA sont associés à des formes graves de la maladie de Crohn, en particulier les formes iliales, fistulaires et sténosantes.
La recherche des ASCA peut être réalisée par immunofluorescence indirecte sur des cultures de Saccharomyces cerevisiae qui met en évidence la fixation des anticorps sur la paroi des levures. Les immunotests en phase solide utilisent comme antigène des « Mannanes » extraits des cultures de Saccharomyces cerevisiae. Les préparations utilisées par les différents fabricants de réactifs sont variables. L'antigénicité des Mannanes est déterminée par la nature des résidus de Mannose, par la longueur des chaînes mannosyl, par la configuration anomérique et par la position des liaisons.
Une simplification de la recherche des ASCA a été récemment obtenue grâce au développement d'immunodots, faciles à utiliser, et adaptés aux petites séries d'analyses : Dot ASCA IgA/IgG (D-TEK, Mons, Belgique) GASTRO-5-LINE (Orgentec, Mainz, Allemagne).
Nous avons évalué ces deux réactifs. 85 échantillons de sérums ont été testés parallèlement avec l'ELISA. Les résultats obtenus avec différentes trousses ELISA feront l'objet d'une publication ultérieure.
Nos premiers résultats montrent une très bonne concordance entre les 2 Immunodots et l'ELISA (figure 1, figure 2).
René-Louis Humbel, LLIP, Luxembourg
Nicole Fabien, CHU, Lyon