Cancado EL, Abrantes-Lemos CP, Vilas-Boas LS, Novo NF, Carrilho FJ, Laudanna AA.
Thermolabile and calcium-dependent serum factor interferes with polymerized actin, and impairs anti-actin antibody detection.
J Autoimmun. 2001;17(3):223-8.

Les auteurs étudient en paralléle la fixation sur des cultures primaires de fibroblastes humains fixés par l'acétone, d'autoAc anti-actine de sérums d'hépatites auto-immunes de type I (HAI) en utilisant ces sérum à 1/10 soit chauffés, soit traités par un chélateur, soit traités et chauffés, soit non-traités. Ils recherchent également l'effet de sérums normaux et de sujets avec HAI (dilution 1/10) soit chauffés, soit traités par un chélateur, soit traités et chauffés, soit non-traités, sur la fixation de phalloïdine marquée à la rhodamine au niveau de l'actine-F des micofilaments de fibroblastes.
Les sérums non-traités gènent la fixation des auto-Ac ou de la phalloïdine sur l'actine, car ils contiennent un facteur thermolabile et calcium-dépendant qui altèrent l'intégrité de l'actine-F entraînant la disparition ou l'inaccessibilité des sites antigènes et aussi de ceux qui se lient à la phalloïdine. Ces sites sont différents, car la phalloïdine n'empêche pas la liaison des auto-Ac à l'actine. Le facteur inhibiteur est la brévine ou gelsoline. Ce phénomène n'est apparent que pour les dilutions faibles du sérum.

Zamanou A, Samiotaki M, Panayotou G, Margaritis L, Lymberi P
Fine specificity and subclasses of IgG anti-actin autoantibodies differ in health and disease.
J Autoimmun. 2003;20(4):333-44.

Les auteurs veulent identifier les spécificités des Ac anti-actine rencontrés dans des affections (HAI et cirrhose biliaire primitive) ou chez les sujets sains. La technique utilisée est l'ELISA avec comme Ag l'actine-F, l'actine-G, l'actine-G dénaturée (actine-D) par la chaleur et des peptides de l'actine notamment le P36 (351-362) séquence LSTFQQMWITKQ. Elle est complété par des blots. Les Ac anti-actine sont préparés par immunoabsorption sur colonne de billes de polyacrylamide-agarose activées par la glutaraldhyde couplées à l'actine-G, suivie par une élution acide. Enfin, ils sont utilisés à la cocentration de 10mg/ml. Les Ac provenant de sujets sains ou malades isolés sur actine-G réagissent aussi avec l'actine-F et l'actine-D. Ils donnent aussi une réaction croisée avec la desmine. Parfois les Ac de malades croisent avec la myosine et la tropomyosine. L'épitope le plus souvent reconnu est le P36.
Quelles réflexions peut-on faire devant ces résultats ?
Des Ac anti-actine-G reconnaissent des épitopes présents aussi sur l'actine-F et l'actine-D, cependant plusieurs fois la réaction est plus élevée avec l'actine-G. On peut donc penser qu'il existe des Ac spécifiques de l'actine-G et des Ac se liant indifféremment avec l'actine-G et l'actine-F. Si l'on rapproche ces constatations de nos connaissances sur les Ac anti-ADN, on peut imaginer l'existence d'Ac spécifiques de l'actine-F, de l'actine-G, de l'actine-D et des Ac qui ne font pas la différence entre ces 3 formes d'actine. Dans ces conditions, les Ac anti-actine-F ont-ils un intérêt diagnostic dans l'HAI puisque des Ac anti-actine-G se fixent sur l'actine-F? Quelle technique de détection doit-on proposer ? De plus les Ac anti-actine sont rapportés par plusieurs auteurs dans des affections autres que l'HAI, comme la CBP, la maladie coeliaque...
Dernière réflexion, il est très surprenant que les auteurs de l'article signalent des Ac anti-ADN natifs ,recherchés sur Crithidia luciliae, chez 40% de leurs malades avec HAI, alors que ces Ac sont exceptionnels en dehors du LED !

Clemente MG, Musu MP, Troncone R, Volta U, Congia M, Ciacci C, Neri E, Not T, Maggiore G, Strisciuglio P, Corazza GR, Gasbarrini G, Cicotto L, Sole G, Fasano A, De Virgiliis S.
Enterocyte actin autoantibody detection: a new diagnostic tool in celiac disease diagnosis: results of a multicenter study.
Am J Gastroenterol. 2004;99(8):1551-6.

Une nouvelle méthode d'IF indirecte est proposée pour détecter les auto-Ac de classe IgA anti-actine-F dans la maladie coeliaque. Elle utilise des cultures de cellules épithéliales intestinales de rat (ATCC-CRL-1592), en présence de colchicine. La dilution initiale des sérums est le 1/5 et la réaction est positive lorsqu'existe une fluorescence de faisceaux intra-cytoplasmiques et de protrusions cytoplasmiques. La spécificité est prouvée pour certains sérums par la négativation de la réaction par absorption à l'aide d'actine de muscles de bovidés (Sigma). Près de 100% des malades avec destruction importante de la muqueuse intestinale ont des auto-Ac anti-actine de classe IgA, cette fréquence tombe à 89% pour les sujets avec une atrophie subtotale des villosités et à 30% pour les atrophies partielles. Il existe une corrélation positive entre titre en Ac et intensité de l'atrophie villositaire.
Par comparaison avec les témoins (sujets souffrant de pathologies digestives avec biopsies et auto-Ac antitranglutaminase négatifs ou seulement sans Ac antitransglutaminase, mais non biopsiés) les Ac anti-actine de classe IgA apparaissent intéressant pour étayer le diagnostic de maladie coeliaque.
On peut remarquer que des Ac qui semblent, d'après l'aspect de la fluorescence, se fixer sur l'actine-F sont absorbé par de l'actine-G. Donc, comme nous l'avons vu dans l'article précédent, des auto-Ac réagissent avec les mêmes sites antigéniques portés par les actines F et G.

J.C. Monier